細胞培養是生命科學研究中常用的實驗手段。不像其它常用的實驗方法,細胞培養是一個動態的連續過程,細胞通常會對操作失誤或污染物有所反應,這些反應往往表現出不正常的細胞狀態或培養基外觀。如果受到支原體污染時,細胞形態較之無明顯變化,極易被忽視,往往直到污染非常嚴重時才能發現。受污染的細胞膜上可能有幾百個支原體,這些支原體競爭營養并釋放有毒的代謝產物,嚴重影響實驗結果。
研究表明,至少二十多種支原體能污染細胞,其中zui常見的有:口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)、發酵支原體(M. fermentans)、人型支原體(M. hominis)、唾液支原體(M.salivarium)、肺支原體(M.pulmonis)和梨支原體(M.pirum)等。培養細胞的支原體污染率在4%-92%不等,其污染來源包括工作環境、操作者本身(一些支原體是人體的正常菌群)、培養基、血清、細胞交叉污染、實驗器材和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。
確認細胞培養過程中出現問題的潛在原因是一項困難且耗時的任務,在細胞培養中,任何突然的變化都應該被懷疑,同時良好的試驗規范和定期檢測支原體污染也十分必要。支原體檢測的方法有很多種,如直接培養、DNA熒光染色、ELISA和PCR法等。
支原體是一類能夠自我復制的zui小的原核生物,可透過一般過濾膜且對抗生素有耐藥性,是原代細胞和傳代細胞的常見污染物,嚴重影響細胞的生長,形態和代謝。
Mycoplasma Detection Kit 支原體PCR檢測試劑盒,能夠快速、準確地檢測細胞培養中的支原體污染。試劑盒中的 Primers 是依據支原體基因組中高度保守的 16SrRNA 編碼域而設計的,只需簡單的 PCR 反應就可檢測 M.Arginini, M.Fermentans, M.Hyorhinis, M.Orale, M.Salivarium, M. Hominis, M.Pneumonia 等常見的支原體。
全套檢測試劑
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操作方法簡便
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樣本容易制備
-細胞培養上清液即可作為 PCR 反應模板
結果分析直觀
-通過常規電泳就可以分析細胞是否被支原體污染
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