細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下,使其生長繁殖,并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個(gè)細(xì)胞,也可以是細(xì)胞群,常規(guī)操作有細(xì)胞接種和傳代、細(xì)胞換液、細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞凍存及復(fù)蘇等。細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā<?xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則,各項(xiàng)操作要保證規(guī)范、科學(xué),不對(duì)細(xì)胞的生長造成額外的影響。96,24孔細(xì)胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松,這樣是方便了透氣,但是細(xì)菌、霉菌等污染物會(huì)不會(huì)也隨著溜進(jìn)去呢?
蓋子很松,屬于半開放培養(yǎng),這樣的目的是透氣(實(shí)際上是為了使培養(yǎng)皿外的CO2能夠與培養(yǎng)皿充分交換,維持培養(yǎng)基的pH值)。
凡事有利必有弊,這樣當(dāng)然增加了污染的可能性。此外這樣還會(huì)使培養(yǎng)皿內(nèi)的液體蒸發(fā),這對(duì)于定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須清潔(定期紫外線照,酒精擦洗,盡量少開關(guān)培養(yǎng)箱)b培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度必須始終保持為100%(培養(yǎng)箱內(nèi)放置無菌蒸餾水的水槽)。
就好像培養(yǎng)皿,也是一個(gè)蓋倒扣的容器,也不會(huì)污染。主要是因?yàn)樯w子“L”型邊緣產(chǎn)生氣流負(fù)壓的緣故,灰塵上面才附著有微生物,而氣流攜帶的灰塵是無法通過產(chǎn)生負(fù)壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴(kuò)散,不會(huì)產(chǎn)生氣流,所以只會(huì)透氣不會(huì)透菌。